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教育材料

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寻找适合的二向色镜分束镜

作者 IDEX Health & Science

美国艺达思健康与科学有限公司生产的二向色镜分束镜用于 45 度入射角,针对不同用途进行了优化。这些二向色镜分束镜利用我们的坚硬的离子束溅射镀膜工艺(IBS),即使在较强的光照条件下,也能提供较好的环境耐久性和手持耐久性,且不会退化。按照与它们一起使用的光 源和各种应用所需的光谱边缘陡度和物理平整度的数值,下表将二向色镜分束镜进行分类。并根据这些要求列出了六大类 Semrock 二向色镜分束镜。它们适用于 TIRF 照明系统,也适用于传统结构照明工艺中成像光束的反射,以及用于局部光活化(photo activation)的结构照明系统。这些二向色镜分束镜允许使用大直径的照明光束,为研究人员和仪器开发人员在系统设计中提供了便捷,同时不影响整体性能。

下表列出了根据这些要求的六大类 Semrock 二向色镜分束镜。

选择指南

光源 边缘陡率 平整度 / 反射波前差 RWE 分级 产品系列
宽带 一般的 常规落射荧光 通用目的二向色镜
宽带 一般的 图像分屏  图像分屏二向色镜
激光线 陡的 激光 激光二向色镜
激光线 陡的 超分辨 / TIRF 超分辨 / TIRF 二向色镜
激光线 一般的 激光 激光陷波二向色镜
激光线 一般的 激光 激光束合束
激光线 一般的 超分辨 / TIRF 多光子激光束合束
激光线; 多光子 陡的 超分辨 / TIRF 多边缘多光子超分辨/ TIRF 二向色镜
精密激光线 更陡的 激光 更陡激光二向色镜

设计用于宽带光源的二向色镜分束镜通常符合在光源波长波段上的平均反射峰值,通常可实现与特定荧光染料吸收光谱的较好重叠。激 光器光源的二向色镜分束镜体现了在特定激光线上的反射峰值的性能,准确的光谱边缘与这些激光线相配合,滤光片背面有抗反(AR) 镀膜,可减少相干干扰伪影。

虽然 Semrock 二相色镜分束镜都处于市场上相对较陡峭的 45° 边缘滤光片的行列,但那些针对基于激光的落射荧光和拉曼应用而优化 的滤光片则进一步增加了陡峭程度,以使尽可能收集接近激光线的信号。

平整度增加后的二向色镜分束镜将进一步减少波前差,波前差会导致滤光片的反射光出现散焦和成像像差。Semrock 将二相色镜分束镜 的平整度分为四类,如下表所示。

备注: 装配过程,比如镶嵌到金属边框中、安装到显微镜镜盒中,或装配到金属支架中,会不同程度影响滤光片的平整度性能,以下值 所标注的都是未装配状态下的参数。

平整度 / 反射波前差 RWE 分级 & 应用参数 (适用于 Semrock 二向色镜分束镜)

平整度 / RWE 分级 标明曲率半径 应用参数
所有分级 所有曲率 透射:在整个通光孔径,不会导致透射光斑出现明显的偏差。
超分辨 / 全内反射荧光 TIRF ~ 1275 米 反射: 在反射直径 22.5 mm 大小的激光光斑后,在镜头的聚焦层面,会导致小于一个瑞利长度的位移(相对于完美的平面镜)。
超分辨 / 全内反射荧光 TIRF ~ 255 米 反射: 在反射直径 10 mm 大小的激光光斑后,在镜头的聚焦层面,会导致小于一 个瑞利长度的位移(相对于平面镜)。
图像分离 / 分屏器 ~ 1275 米 反射: 在一个直径为 37 mm 的反射光斑,会导致小于 1.5 倍艾利斑直径的均方根值 的位移。
图像分离 / 分屏器 ~ 100 米 反射: 在一个直径为 10 mm 的反射光斑,会导致小于 1.5 倍艾利斑直径的均方根值的位移。
激光 ~ 30 米 反射: 在反射 2.5 mm 直径大小的激光光斑后,在镜头的聚焦层面,会导致小于一个瑞利长度的位移(相对于平面镜)。
常规落射荧光 ~ 6 米 反射: 该系列产品设计用于反射宽带激发光,此反射光不用于聚焦或成像。

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