一个分子吸收其吸收谱带波长范围（即吸收光谱内）的光，然后几乎发出较长的位于其发射谱带波长范围（即发射光谱）内的光，此时，就会发生光学荧光。为了达到分析的目的，强的荧光分子（亦被称为荧光团、荧光染料）专门用于连接到生物分子或其他感兴趣的目标，用于鉴定、定量、甚至实时观察物质的生物和化学性质。荧光染料因为具有独特的灵敏度、高特异性和简单性，被广泛应用于生物技术和分析检测中。大多数荧光仪器，包括荧光显微镜，都是基于滤光片。

荧光设备中包括什么滤光片？

一个典型的系统有三个基本的滤光片组成：激发滤光片（或吸收滤光片），二向色镜分束镜（或二向分色镜）和发射滤光片（或阻挡滤光片）。激发滤光片通常是一个带通滤光片，它只透过荧光染料的吸收波长，从而减少荧光的其他来源的激发光和阻挡荧光发射带内的激发光。二向色镜分束镜是一种边缘滤光片，用于斜角入射 （通常是 45 °），以有效地反射激发波段的光和透射发射波段的光。Semrock 发射滤光片通常是一个带通滤光片，仅透过荧光染料的发射波长，并阻挡这个波段之外的所有不需要的光 – 尤其是激发光。通过滤光片阻挡不需要的激发能量（包括紫外和红外）或样品和系统的自发荧光，就可以得到具有黑暗背景的荧光图像。

Semrock 滤光片如何优化您的荧光应用？

大多数的 Semrock 滤光片组综合考虑了亮度和信号噪声比的要求。这些滤光片组是标准成像条件下滤光片组的好的选择。但是，当样本的信号较弱时，更宽的激发滤光片和发射滤光片的组合可以增加信号采集效率。在单分子成像等研究中，通常使用具有宽带通或长通的发射滤光片的滤光片组。在使用这些滤光片组的研究中，需要通过合适的样品制备流程来保持非常低的背景自发荧光，然而，由于这样的宽带通滤光片组占用了很大的光谱带宽，不适合用于需要多种荧光染料成像的多色成像。

对于多种荧光染料标记的样品成像来说，应该选择更窄的带通滤光片组。这样的滤光片组能显著减少多个荧光染料之间的串色。狭窄的通带只允许透过荧光发射光谱中强的部分。对于具有自发荧光的背景噪声高的样品，可以显著降低样品的自发荧光，从而提高信噪比。高信号噪声比的滤光片组适合用于荧光信号强的样品。

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