荧光滤光片简介

一个分子吸收其吸收谱带波长范围(即吸收光谱)内的光,然后几乎瞬间发出较长的、位于其发射谱带波长范围(即发射光谱)内的光,此时,就会发生光学荧光。为了达到分析的目的,强的荧光分子,亦被称为荧光团、荧光染料,专门用于连接到生物分子或其他感兴趣的目标,用于鉴定、定量、甚至实时观察物质的生物和化学活性。荧光染料因为具有独特的灵敏度、高特异性和简单性,被广泛应用于生物技术和分析检测中。大多数荧光仪器,包括荧光显微镜,都是基于光学滤光片。

一个典型的系统有三个基本的滤光片组成:激发滤光片(或吸收滤光片),二向色镜分束镜(或二向分色镜)和发射滤光片(或阻挡滤光片)。激发滤光片通常是一个带通滤光片,它只透过荧光染料的吸收波长,从而最大限度地减少荧光的其他来源的激发光和阻挡荧光发射带内的激发光。二向色镜分束镜是一种边缘滤光片,用于斜角入射 (通常是 45 °),以有效地反射激发波段的光和透射发射波段的光。Semrock 发射滤光片通常是一个带通滤光片,仅透过荧光染料的发射波长,并阻挡这个波段之外的所有不需要的光 - 尤其是激发光。通过滤光片阻挡不需要的激发能量(包括紫外和红外)或样品和系统的自发荧光,就可以得到具有黑暗背景的荧光图像。

我们可以通过选择适当的光学滤光片,组成一个滤光片组,用于观察荧光或者对荧光进行成像,这样就可以达到使一个给定的荧光染料可视化的目的。因为不同荧光染料的激发光谱和发射光谱不同,滤光片组需要优化,才可以用于不同荧光染料的同时成像。在不同的实验条件下使用同一个荧光染料时,滤光片组也需要优化。

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