荧光共振能量转移(FRET)

荧光(或 Förster)共振能量转移(FRET)是一种在分子尺度上描述距离相关的相互作用的强大技术。FRET 开始于“供体”荧光染料分子,供体在其吸收光谱内受到入射光的激发。如果另一荧光染料分子(“受体”)与供体非常接近,并且具有与供体发射光谱重叠的吸收光谱,则供体和受体之间可能发生非辐射能量转移。例如,CFP 和 YFP支持一个强的 FRET交互作用。FRET 可以按“Förster距离”的法制测量距离,通常为20至90 Å 。该长度标度远低于光学显微镜的瑞利标准分辨率极限(可见光和高数值孔径约为2500 Å ),因此说明了 FRET 可用于测量极小距离间的相互作用。

下图显示了 CFP 和 YFP 吸收和发射光谱,以及 FRET-CFP/YFP-A 滤光片组中滤光片的透射光谱。该滤光片组和上面列出的那些滤光片组都专门优化,适用于 FRET - 显微镜盒成像方法。

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