FISH(荧光原位杂交)

荧光原位杂交用于通过互补探针序列的杂交来显示确定的核酸序列。FISH 有很多应用,从基本的基因定位到染色体畸变的诊断(细胞遗传学)。多色 FISH 图像分析需要使用单独的滤光片激发块(立方体)或激发滤光片转轮结合多波段二向色镜和发射滤光片来隔离各种信号。

荧光免疫原位杂交(FISH)和 多路复用(Densely Multiplexed)成像的串色

当同时使用具有多个密集光谱的荧光染料时,区分荧光标记的能力决定了检测结果的速度和准确性。在进行荧光免疫原位杂交 (FISH)测量时,这种密集的图像复用特别重要。因此,减少串色(即来自不希望的荧光染料的信号相对于所需荧光染料的信号影 响)至关重要。下表量化了使用特定的 BrightLine 荧光免疫原位杂交(FISH)滤光片组时,相邻荧光染料之间的串扰值。该串扰值 决定于典型的归一化荧光染料光谱、滤光片的设计光谱和强金属卤化物灯光谱的重叠。

这些结果已经针对每个给定的滤光片组进行了标准化,因此用户应该读取每行(而不是每列)的值以查看给定滤光片组的预期串扰值。

例如,当使用 SpectrumGold™ 滤光片组对标记有 SpectrumGreen™、SpectrumGold™ 和 SpectrumRed™ 荧光染料的样品进行 成像时,不需要的 SpectrumGreen 信号将小于所需要的 SpectrumGold 信号的 2%,并且 SpectrumRed 信号将小于1%。

好的滤光片会带来哪些不同 ?

BrightLine“不易烧熔”滤光片在多年的使用中,在研究和临床领域都得到了广泛的测试。BrightLine 荧光免疫原位杂交 FISH 滤光片组也进行了严格的独立测试。结果显示:使用 BrightLine 滤光片组进行荧光免疫原位杂交 FISH 分析时,无论您是查找 和分析中期分裂,还是通过点计数对细胞进行评分,都可以提高分析的速度和准确性。

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技术说明

荧光滤光片简介

装配滤光片镜盒

显微镜中滤光片的方向

多带滤光片组配置术语

什么是像素位移?

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荧光显微镜中的光谱建模

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